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以褐藻醣膠及季銨化幾丁聚醣組成的奈米顆粒作為炭疽疫苗替代佐劑之研究

為了解決mfi傳輸線的問題，作者莊傳昌 這樣論述：

疫苗開發是防治傳染病流行最有效的方法之一，例如從天花的滅絕，到最近非洲伊波拉病毒的阻絕，都展現了疫苗無可取代的醫學價值。疫苗的發展需兼顧有效性及安全性，為了誘發更優質的免疫反應，必須於疫苗配方中添加佐劑，以強化疫苗的疫原性。添加佐劑後，首先需避免非專一性先天免疫過激反應，以降低免疫毒性。其次需考量疫苗在尚未誘發免疫保護力前的接種初期，抗原能得到承載及保護，以便後續誘發具專一性的適應性免疫反應。在此論文中，我們以 FDA 認可的人用炭疽疫苗 (AVA; BioThrax) 作為研究標的，藉由褐藻醣膠 (FUC) 與N-[(2-羥基-3-三甲基銨)-丙基]幾丁聚醣 (HTCC) 組合，開發

出可以強化免疫之新型 FUC-HTCC 奈米粒子 (NPs)，來改善 AVA 疫苗誘發免疫力弱及需多次施打的缺點。本論文中藉由改變 FUC 和 HTCC 的質量比，以聚電解質複合反應 (polyelectrolyte complexation; PEC) 製備出帶正 (+) 或負 (–) 界面電位的 FUC-HTCC NPs，並且透過傅立葉轉換紅外線光譜 (FT-IR) 的分析、穿透式電子顯微鏡 (TEM) 的觀察及粒徑分析儀 (Zetasizer) 的測量，來判定 NPs 的生成。同時，藉由活體外 MTT 試驗及乳酸脫氫酶 (LDH) 釋放試驗證明，這些 (+)-NPs 或 (–)-NPs

對 L929 纖維母細胞或 JAWS II DCs的生長活力並不會造成影響，也不會有造成細胞膜損傷的細胞毒性。而且，以流式細胞儀 (Flowcytometry) 進行定量分析顯示，帶正或負界面電位的 NPs 被 JAWS II DCs攝入的效率均十分良好，而 (–)-NPs 又較 (+)-NPs 有更佳的細胞攝入率。此外，我們也觀察到，與含寡脫氧核苷酸 (CpG ODNs) 混合的 AVA 或單獨以 AVA 注射免疫的實驗組小鼠相比，以 (+)-FUC-HTCC NPs 與 AVA 混合注射免疫 A/J 小鼠，可顯著增加抗炭疽保護性抗原抗體生成的效率及效價。在保護力評估方面，與用 AVA 混合

CpG ODNs 免疫 (存活率75%)、單獨AVA免疫 (存活率50%) 或對照組 (存活率0%) 等實驗組別的小鼠相比，以 AVA 混合 (+)-FUC-HTCC NPs 免疫注射的小鼠，在以炭疽致死毒素攻毒挑戰後的存活率最高 (100%)。綜合以上研究結果顯示，我們認為以 FUC-HTCC NPs 做為 AVA 或其他疫苗的載體或佐劑，在改善疫苗之免疫效率及快速產生免疫保護力上極具發展潛力。