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real time pcr原理的問題,我們搜遍了碩博士論文和台灣出版的書籍,推薦吳游源寫的 PCR之原理與應用 和趙遠的 現代環境生物技術與應用都 可以從中找到所需的評價。

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這兩本書分別來自五南 和中國石化所出版 。

長庚大學 生物醫學工程研究所 林彥亨所指導 翁胤翔的 使用聚碳酸酯基材製作超快速微流體聚合酶連鎖反應晶片 (2018),提出real time pcr原理關鍵因素是什麼,來自於聚合酶連鎖反應、微流體生醫晶片、肺結核。

而第二篇論文國立聯合大學 化學工程學系碩士班 趙恩中、林永昇所指導 馬守昱的 聚合酶連鎖反應微流體晶片平台之開發 (2017),提出因為有 實驗室晶片、聚合酶連鎖反應、微流體、液滴的重點而找出了 real time pcr原理的解答。

最後網站real-time RT-PCR你真的区分的开吗?_实验方法 - 丁香通則補充:在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。 了解更多:RT-PCR原理与实验技术、RT-PCR技术概述、PCR/RT ...

接下來讓我們看這些論文和書籍都說些什麼吧:

除了real time pcr原理,大家也想知道這些:

PCR之原理與應用

為了解決real time pcr原理的問題,作者吳游源 這樣論述:

  聚合酶鏈鎖反應(polymerase chain reaction; PCR)是一個被高度依賴、且被普遍應用的分子生物學技術,它可以將一特定DNA片段(或基因)由構造複雜的染色體或其他DNA來源(或樣品)中大量增幅出來。這就好像是一個超炫的戲法,可以由一堆如山的黃沙中,將其內所埋藏的幾顆金沙子篩選出來,並且複製成幾百萬顆金沙。如此,不但可以證明沙堆中確有金沙子的存在,並可以因此獲得大量的金沙。換句話說,PCR是一個分析型(analytical)也是一個製備型(preparative)的研究工具,它不但可以藉由強效的增幅機制,來偵測一個DNA樣品中是否含有   某一特定

DNA片段(或基因),而且藉由增幅可以大量製取(有時也可加以修飾)此DNA片段,以作為多種生技應用研究之材料,例如DNA 定序、基因選殖、重組蛋白表現等。此項技術可說是現今分子生物學研究中最重要的分析工具之一,同時也是多數從事生物醫學、分子遺傳分析、及基因診斷等相關領域研究所不可或缺的技術。  

使用聚碳酸酯基材製作超快速微流體聚合酶連鎖反應晶片

為了解決real time pcr原理的問題,作者翁胤翔 這樣論述:

本研究係利用聚碳酸酯當作快速聚合酶反應微流體晶片的材料,進行肺結核快速檢測。結核病屬於飛沫傳染性疾病,通常造成肺部感染,但大都數為潛伏結核感染使患者沒有症狀浮現因此錯過適當治療,而有10%的潛伏患者會惡化為開放性感染,致死率高達50%。而塗片檢查和透過培養方式被廣泛用於在肺結核上的診斷,但傳統檢測方式是利用細菌培養方式進行數天的時間進行細菌增殖分析,以分子診斷技術也須將近數小時時間才能得到結果,相對於病患來說數小時等待還是過於太久。因此本實驗中透過微流體晶片快速聚合酶反應方式去擴增肺結核中特定基因片段,晶片利用連續流方式透過兩塊加熱板達到快速熱平衡,固定式溫控設備主要由比例-積分-微分控制器

、加熱片、熱電偶及鋁塊製成。晶片製程主要分為上下兩層,上層部分基板與業界廠商合作利用射出成行方式大量製造,下層部分則使用厚度100 μm的聚碳酸酯薄膜,透過有機溶液的方式進行黏合,此方式比起單純熱壓方式更為迅速,從塗佈至熱壓黏著只需幾秒內即可完成,此外,研究亦發現透過黏度低的油當作載體,可使流速趨於穩定,透過結核桿菌的基因序列進行快速聚合酶反應驗證透過溫度上的探討發現在實驗中annealing從60°C ~74°C溫度上都有產物出現,因此挑選三個最亮產物的中間值68°C 為annealing溫度,而denaturation範圍更廣分別從93°C ~101°C進行測試,每個溫度範圍都有產物,因此

為了確保安全選擇中間值 97°C為denaturation溫度,之後進行流道比例上的調整,發現增加annealing溫度區的持溫時間,縮短denaturation的持溫時間可以使產物亮度逐漸增量,最終為了確保晶片參數的穩定及晶片汙染性,重複測試五次相同條件,在使用重複使用過的晶片跑一次聚合酶連鎖反應,發現到穩定性的測試最終都有出現正確產物,而汙染性也有出現正確產物,並沒有因為重複晶片上的使用而導致錯誤的產物,目前研究結果能將聚合酶反應每個循環時間縮短至8秒,共30個循環,總時間只需四分鐘即可完成。

現代環境生物技術與應用

為了解決real time pcr原理的問題,作者趙遠 這樣論述:

現代環境生物技術是現代生物技術與環境科學緊密結合形成的新興交叉學科。本書系統講述了現代生物技術的主要內容及其在環境學科中的重要應用,以環境污染與生物技術之間的互動為核心,結合一些熱點問題,對環境生物技術在環境保護領域污染治理中的應用進行了探討。   書中主要介紹了酶工程、基因工程、細胞工程、發酵工程和蛋白質工程五大工程的基本原理,以及五大工程在環境污染治理中的應用,內容涉及環境生物技術、污染治理和預防、廢物資源化利用、環境生物監測相關方法及物件以及安全性評價等。 趙遠,1991年參加工作,主要從事遺傳育種和分子生物學及環境微生物技術等教學與科研工作,2008年4月進入清華大

學博士後流動站從事工業生態學與環境微生物技術科研工作,2010年6月進入常州大學環境學院工作。曾為本科生、研究生主講《分子生物學》、《環境微生物學》、《植物學》和《生命科學前沿技術》等課程。2005年開始指導研究生工作。 在二十多年的研究工作中,主持或參加了各種科技部或省科技廳科技攻關專案9項,國家自然科學基金或省自然科學基金4項,國家風險基金專案2項,973、863專案2項,以及其他一些項目。同時獲得省部級及市廳級獎項5項,發表文章40多篇,其中第一作者二十余篇。 第一章緒論(1) 第一節生物技術概論(1) 一、生物技術的定義(1) 二、生物技術的發展(1) 三、生物技術

的應用(2) 第二節環境生物技術概論(3) 一、環境生物技術的定義(3) 二、環境生物技術的優勢(3) 三、環境生物技術的研究內容(3) 四、環境生物技術應用的研究進展(3) 第三節現代環境生物技術(4) 一、現代環境生物技術的發展(4) 二、現代環境生物技術的特點(5) 第四節本書概述(6) 參考文獻(7) 第二章酶工程(8) 第一節酶的基本概念(8) 一、酶的命名(9) 二、蛋白類酶(P酶)的分類(9) 三、核酸類酶(R酶)的分類(11) 四、酶的組成(13) 第二節酶的催化特性(14) 一、酶催化作用的專一性(14) 二、酶催化作用的高效性(14) 三、酶催化作用的條件(15) 第三節

酶作用原理(15) 一、酶分子的結構基礎(15) 二、酶作用原理(16) 第四節酶催化反應動力學(18) 一、米氏方程的提出(18) 二、米氏方程的推導(19) 三、米氏方程的討論(20) 四、米氏常數Km的意義(22) 第五節酶促反應的影響因素(23) 一、酶濃度對酶促反應的影響(23) 二、底物濃度對酶促反應的影響(24) 三、溫度對酶作用的影響(24) 四、pH對酶促反應的影響(25) 五、抑制劑對酶促反應的影響(26) 六、啟動劑對酶促作用的影響(28) 第六節酶的生產及分離純化(28) 一、酶的生產(29) 二、產酶菌種要求(30) 三、提高酶產量的方法(32) 四、打破酶合成調節機

制限制的方法(33) 五、酶的分離純化的基本原則(34) 六、酶的分離純化(34) 第七節酶工程研究進展(36) 一、酶的應用研究進展(36) 二、酶學理論研究(37) 三、酶工程研究的重要意義(38) 第八節酶工程的應用(39) 一、酶工程在醫藥方面的應用(39) 二、酶工程在食品方面的應用(42) 三、酶在輕工、化工產品製造方面的應用(46) 四、酶在環境保護方面的應用(49) 參考文獻(52) 第三章基因工程(54) 第一節基因工程概述(54) 一、基因工程的發展(54) 二、基因工程的內容(56) 第二節基因技術的分子生物學基礎(58) 一、DNA結構和功能(58) 二、DNA的存在

形式(70) 三、DNA資訊傳遞鏈的複製(72) 四、DNA的變性、複性和雜交(73) 五、特定基因片段的PCR擴增(75) 六、遺傳信息的傳遞和中心法則(76) 第三節基因工程工具酶(77) 一、限制性核酸內切酶(77) 二、連接酶(79) 三、DNA聚合酶(80) 四、DNA修飾酶(80) 第四節基因工程載體(81) 一、質粒克隆載體(82) 二、病毒(噬菌體)克隆載體(84) 三、染色體定位克隆載體(87) 四、人工染色體克隆載體(87) 五、特殊用途的染色體載體(88) 第五節目的基因的獲得(88) 一、基因的概念(88) 二、目的基因的來源(89) 三、獲得目的基因的途徑(89) 第

六節目的基因的轉移(96) 一、基因表達載體的構建(96) 二、將目的基因導入受體細胞(97) 第七節重組體的篩選(100) 一、表型特徵篩選(遺傳檢測法)(101) 二、菌落(噬菌斑)原位雜交篩選(104) 三、免疫學方法篩選(106) 四、結構分析篩選(106) 五、轉譯篩選(107) 第八節基因工程技術與方法(108) 一、凝膠電泳技術(108) 二、雜交技術(109) 三、PCR技術(110) 四、生物晶片(112) 五、基因文庫構建(113) 六、酵母雙雜交系統(113) 七、DNA測序(114) 第九節分子生態技術(115) 一、原位螢光雜交(FISH)(115) 二、變性梯度凝膠

電泳(DGGE)(115) 三、末端限制性酶切(T-RFLP)(116) 四、長度異質性PCR(LH-PCR)(116) 五、核糖體基因間隔序列分析(ribosoma lintergenic spacer analysis,RISA)(116) 六、單鏈構象多態性分析(single-strand conformation polymorphism,SSCP)(116) 七、定量即時PCR(quantitative real-time PCR)(117) 第十節轉基因技術(transgenic technology)(117) 一、發展歷史(117) 二、技術目的(118) 三、主要分類(118

) 四、技術原理(119) 五、遺傳轉化方法(121) 六、鑒別方法(122) 七、轉基因技術的應用(123) 八、管理措施(130) 第十一節基因工程在污染治理中的應用(131) 一、在重金屬污染治理上的應用(131) 二、在農藥污染治理上的應用(132) 三、在石油污染治理上的應用(133) 四、在表面活性劑污染治理上的應用(134) 五、在農業污染治理上的應用(134) 六、在廢水污染物治理中的應用(135) 參考文獻(135) 第四章細 胞 工 程(137) 第一節細胞工程基礎知識(137) 一、細胞工程的基本概念(137) 二、細胞工程的發展歷程(138) 三、細胞工程的研究內容(

139) 四、細胞工程的發展前景(142) 第二節微生物細胞工程(142) 一、微生物細胞融合(143) 二、真菌的原生質體融合(146) 三、微生物發酵(146) 四、微生物細胞工程中的應用(148) 第三節植物細胞工程(149) 一、植物細胞工程的基本原理(150) 二、植物組織培養(151) 三、植物細胞工程的實際應用(152) 四、植物的胚胎培養與離體授粉(157) 五、植物種質資源的超低溫保存(158) 第四節動物細胞工程(160) 一、動物細胞培養所需的基本條件(161) 二、動物細胞工程常用技術(161) 三、動物細胞染色體工程(165) 四、胚胎工程(168) 第五節細胞工程的

應用(171) 一、農業(172) 二、醫藥衛生(173) 三、工業(174) 四、環境保護(174) 五、能源(178) 參考文獻(179) 第五章發酵工程(180) 第一節發酵工程概述(180) 一、發酵的概念(180) 二、發酵工程的概念(180) 三、發酵工程的歷史發展(181) 四、發酵類型(182) 五、發酵工程的特點(183) 六、發酵工程菌種的特點(184) 七、發酵技術的應用(185) 第二節微生物發酵過程(185) 一、微生物發酵過程的類型(185) 二、發酵工業中的常用微生物(186) 三、發酵工業培養基(189) 四、發酵的一般過程(194) 第三節菌種選育(195)

一、菌種的來源(195) 二、菌種的分離篩選(196) 三、菌種的選育(197) 第四節發酵生物反應器(197) 一、液體好氧發酵罐(198) 二、液體厭氧發酵罐(203) 三、固態發酵反應器(204) 四、新型生物反應器(205) 五、生物反應器設計原則(207) 六、發酵動力學(208) 第五節發酵過程監測(208) 一、菌體濃度的影響及控制(208) 二、基質的影響及控制(209) 三、溫度對發酵的影響及控制(210) 四、pH值的影響及控制(211) 五、溶氧的影響及控制(212) 六、CO2的影響及其控制(213) 七、發酵終點的判斷(214) 第六節發酵過程檢測與優化(214)

一、發酵過程檢測(215) 二、發酵過程優化(216) 第七節發酵工業的發展趨勢(217) 一、我國發酵工業的現狀(217) 二、我國發酵工業存在的問題(219) 三、我國發酵工業未來發展趨勢(220) 參考文獻(221) 第六章蛋白質工程(222) 第一節概述(222) 一、蛋白質工程的基本途徑(222) 二、蛋白質工程的研究核心內容(223) 三、蛋白質工程的基本程式(224) 第二節蛋白質設計(225) 一、蛋白質分子設計的原理(226) 二、蛋白質分子設計的原則(228) 三、蛋白質分子設計的流程(229) 四、蛋白質分子設計的類型及方法(230) 第三節蛋白質分子特異性(230)

一、蛋白質結構的基本條件(230) 二、蛋白質的一級結構(232) 三、蛋白質的高級結構(232) 四、蛋白質分子間的相互關係(233) 五、蛋白質分子構象與功能的關係(235) 第四節蛋白質工程原理(235) 一、蛋白質工程的理論研究(236) 二、基因水準改造蛋白質(236) 第五節蛋白質的純化和鑒定技術(239) 一、蛋白質的分離純化原理及步驟(239) 二、電泳技術(244) 三、萃取技術(247) 四、色譜技術(248) 五、二維電泳技術(2-DE技術)(249) 六、質譜技術(250) 七、層析技術(251) 八、透析技術(252) 第六節蛋白質工程應用(254) 一、干擾素的保存

(254) 二、生產單體速效胰島素(254) 三、水蛭素改造(254) 四、生長激素改造(255) 五、治癌酶的改造(255) 六、蛋白質技術在石油化工領域的應用(255) 七、蛋白質工程的前景(258) 參考文獻(258) 第七章現代生物技術研究與應用進展(260) 第一節現代生物技術研究與應用概述(260) 一、細胞工程研究進展(260) 二、酶工程研究進展(261) 三、發酵工程研究進展(261) 四、基因工程研究進展(262) 五、蛋白質工程研究進展(263) 第二節現代生物技術在廢水處理中的研究進展(264) 一、微生物處理污水的機制(264) 二、汙水處理中的特殊微生物(265)

三、汙水處理的主要裝置(265) 四、現代生物技術在廢水治理中的應用和發展(267) 第三節現代生物技術在環境生物監測中的應用(270) 一、生物監測的基本概念(270) 二、現代生物技術分析(271) 三、現代生物技術在環境監測中的實踐(276) 第四節現代生物技術在大氣污染中研究進展(278) 一、大氣污染(278) 二、主要大氣污染物(279) 三、環境影響因素(280) 四、大氣污染危害(281) 五、現代生物技術在大氣污染中的研究(282) 第五節現代生物技術在土壤污染治理中的研究進展(285) 一、土壤污染物(285) 二、土壤環境背景值研究(287) 三、微生物修復技術(288

) 四、植物修復技術(292) 五、微生物-植物修復技術(294) 六、高通量測序技術(304) 第六節現代生物技術在固體廢棄物處理的研究進展(306) 一、概述(306) 二、堆肥(307) 三、填埋技術(307) 第七節生物採油技術(309) 一、微生物勘探石油的發展歷史及原理(310) 二、生物採油存在的問題及發展趨勢(312) 三、生物採油技術工程實例(313) 第八節現代生物技術的安全性問題(317) 第九節現代生物技術的倫理問題(317) 參考文獻(318)

聚合酶連鎖反應微流體晶片平台之開發

為了解決real time pcr原理的問題,作者馬守昱 這樣論述:

近年來,食品摻偽問題層出不窮,引起社會大眾的關注,造成人們對於食品安全產生疑慮。目前傳統分析方法如高效能液相層析儀、氣相層析儀、毛細管電泳,雖然偵測較靈敏,但儀器價格較貴、體積較大,故本研究藉由基因檢測的方式,透過聚合酶連鎖反應(PCR)結合微流體晶片,利用其減少樣品與反應試劑的使用量、設備微小化、分析速度快及操作簡單等優點,進而開發PCR微流體晶片檢測平台。本研究組件包含聚二甲基矽氧烷(PDMS)微流體晶片、溫控加熱平台和螢光顯微鏡系統,利用二種互不相溶之液體通過十字型微流道,其連續相為礦物油,分散相為PCR反應試劑,以液滴的形式進行PCR,改善PCR反應試劑蒸發的問題。透過本系統進行秤重

法實驗得知,PCR液滴形式於晶片內比PCR反應試劑直接注入於晶片減少 7.103% 之PCR反應試劑的蒸發,可避免氣泡產生,進而穩定流序,應用於PCR擴增反應,並使用 100 µm 十字流道的液滴 PCR 微流體晶片,可成功擴增出芝麻 146 bp、花生 181 bp、沙門氏桿菌 237 bp 和金黃色葡萄球菌 406 bp 之不同基因的特定DNA序列。另針對花生使用SigmaCote 表面處理過之 200 µm 十字流道的液滴PCR微流體晶片進行PCR,能夠縮短PCR每一熱循環時間,從 100 µm 十字流道的 18秒,減為 200 µm 十字流道的 13 秒,加快整體PCR的反應時間,可順

利擴增DNA得到PCR產物。除電泳驗證擴增產物外,經螢光顯微鏡檢測系統亦可成功測得 SYBR Green PCR 混合試劑之花生擴增產物。所以,本研究建立之平台能達到快速檢測基因的目的,並提高PCR之反應效率。