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國立屏東科技大學 獸醫學系所 林茂勇、劉宏仁所指導 柯冠銘的 台灣新近分離新城病毒之研究 (2009),提出g病毒關鍵因素是什麼,來自於F蛋白、HN蛋白、親源性分析。

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為了解決g病毒的問題,作者李浩英 這樣論述:

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台灣新近分離新城病毒之研究

為了解決g病毒的問題,作者柯冠銘 這樣論述:

新城病(Newcastle disease ;ND)係由ND病毒(ND virus;NDV)所引起之家禽重要惡性呼吸、消化和神經系統性傳染病。近年來世界各地NDV抗原性的變異情形頗為常見,造成ND的爆發甚為普遍,台灣也於1999年跟隨全世界的ND瘟疫在某些地區爆發較多病例,並迅速擴及全台,其後仍偶見發生直到2008年。探索近年來台灣發生的ND病例大都發生於經ND疫苗免疫的雞群;而在診斷也出現與傳統血球凝集抑制(HI)診斷抗原(以Ishii株製成)無法產生交叉反應之新病毒株。本研究檢測新分離之NDV30株在腦內病性指數 ( ICPI:1.54-1.76)和平均死亡時間 ( MDT:36-48小

時)檢測上均予歸為急性內臟型(VV) NDV (VVNDV) 。30株2002-2008年台灣地區所分離之NDVs中有29株(96.7%)屬於VIIe基因亞型,只有1株(3.3%)屬於VIIc基因亞型。VIIe基因亞型與其它VII基因亞型(VIIa、VIIb、VIIc及VIId)之核苷酸序列差異性分別為5.9-12.4%、9.3-12.8%、3.6-8.3%和3.9-6.8%。VIIe基因亞型與其它基因亞型(VIIa、VIIb、VIIc及VIId)之胺基酸序列差異度分別為5.9-15.2%、8.5-12.3%、3.3-12.3% 及5.0-9.5%。台灣地區分離NDV之核苷酸演化速率在VIIe

亞型及VIIc亞型分別為9.98X104及3.21X104 bp/year。以F蛋白(aa 1-125)胺基酸序列之變異分析顯示,台灣分離VIIe基因亞型NDVs以其核苷酸序列之變異情形又可區分為VIIe1、VIIe2、VIIe3及VIIe4四小群。VIIe2之F蛋白胺基酸具有L23 F和T90  A之變異。VIIe3亞型則具有三個胺基酸序列的分別於特殊變異(E74  G 、A75 G及Q114  K)。VIIe4亞型具有三個胺基酸序列的特殊變異(I26  T, T29  A和A75  G)。病毒在這些胺基酸的變異或許是造成近年來臺灣地區分離NDVs之致病性和抗原性改變有關。因

為發生在VIIe3和VIIe4小群之2 個重要胺基酸改變(E74  G、A75  G)恰好是 F蛋白質的中和抗體抗原決定位所在。台灣分離株HN蛋白大小為571個胺基酸。分析目前台灣分離NDV之HN蛋白之胺基酸序列發現有6個胺基酸 (R197  K、S200 L、H203 Y、E347 G、R352 T及S521 N) 發生變異,這些胺基酸的變異可能會影響HN蛋白的抗原性及其他功能。本實驗將原型及改變HN基因之二個病毒(TW/02-302HNM81I及TW84-1211HNI81M)之HN基因轉染至COS-7細胞中,在細胞表現I81M變異的HN蛋白若與M81I變異HN蛋白相較

,會降低其對紅血球吸附的能力。以Sato (genotype III)及TW/02-301株(genotype VIIe) NDV製備鋁膠不活化疫苗,在經免疫21日齡蛋雞進行交叉保護性試驗,發現蛋雞免疫TW/02-301做成之自家疫苗對TW/02-301株攻擊的死亡率0%,對Sato株做成之死毒疫苗免疫組之死亡率為 42.6%,陰性對照組雞則全部死亡。台灣新近分離之VVNDV在F、HN及P/V基因已發生些許變異,此顯示台灣ND之疫情須以台灣新分離之VVNDV製備之不活化疫苗才能加以有效的控制。