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弘光科技大學 生物產業研究所 胡惠瑜、許文輝所指導 陳韋孝的 開發抗噬菌體的Corynebacteriumglutamicum及從細菌中篩選lysineracemase基因 （2008），提出argb控制關鍵因素是什麼，來自於消旋酶、基因篩選。

而第二篇論文國立臺灣大學 農業化學研究所 黃慶璨所指導 陳瑋耘的 以米麴菌表達由Piromycessp.T2分離出的木聚醣酶基因 （2002），提出因為有 米麴菌、甘油醛-3-磷酸脫氫酶、啟動子、木聚醣酶、基因、異源蛋白質表達的重點而找出了 argb控制的解答。

最後網站COUGAR CORE BOX V3- Lighting Controller則補充：ARGB / PWM風扇控制器. COUGAR CORE BOX V3控制器能同時提供多組PWM風扇調節及ARGB燈光控制，為玩家帶來更 ...

接下來讓我們看這些論文和書籍都說些什麼吧：

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開發抗噬菌體的Corynebacteriumglutamicum及從細菌中篩選lysineracemase基因

為了解決argb控制的問題，作者陳韋孝 這樣論述：

Corynebacterium glutamicum NCHU 87078是工業上主要用來生產味精的菌種，在一次的敗槽當中，本實驗室從C. glutamicum NCHU 87078的發酵液中分離出Corynephage P1201，此噬菌體的感染特性是屬於溶裂循環型。本實驗室將C. glutamicum NCHU 87078上的16S rDNA和pepc 基因構築於pOK12載體上，此載體上帶有抗kanamycin基因，用電轉型方式將質體插入在C. glutamicum NCHU 87078的染色體上。發現這些轉型株都可以抵抗噬菌體P1201的感染，因此將轉型株的染色體DNA抽取存化後，利

用限制酶Mfe I及Kpn I剪切，隨後將剪切後的DNA片段利用連接酶連接，這些接合後的片段轉型至E. coli中，用kanamycin進行篩選，將轉型進去的質體回收。DNA序列分析後發現此質體是插入在C. glutamicum NCHU 87078染色體上的pepc基因位置，進一步比對發現pepc下游基因為secG基因，secG基因是一個膜蛋白基因，主要是調控細胞膜之間蛋白質的訊息轉位(translocation)，控制訊息蛋白質在細胞膜的進出，因此利用RT-PCR分析此基因的表現量是否受到質體DNA插入的影響。結果顯示，secG基因是有正常表現的，並沒有因為基因的插入而受到影響。因此，質體

插入後將secG基因破壞使C. glutamicum變成對P1201的感染具有抗性之論點無法成立。 土壤metagenome基因庫中的lysine racemase (lyr)基因已被篩選出並發表，在其他報告中也提到有些微生物具有lysine racemase的活性，但lyr基因則至目前為止仍未被從微生物中選殖出來，因此本研究的目的是希望能從細菌中篩選出lyr基因。利用HPLC分析結果証實文獻中所提到含有此酵素活性的微生物Proteus mirabilis BCRC 10725、Citrobacter freundii BCRC 12292 和Pseudomonas putida DSM84

的確都具有lysine racemase的活性，因此將這3株菌株的染色體基因庫建立在質體pQE30上，用以選殖出lyr基因。將帶有P. putida DSM84染色體DNA片段的重組質體轉型入E. coli BCRC 51734後，培養於含D-lys的M9培養基上，以選殖lysine racemase基因，但至目前為止仍未能篩選出此基因。

以米麴菌表達由Piromycessp.T2分離出的木聚醣酶基因

為了解決argb控制的問題，作者陳瑋耘 這樣論述：

米麴菌Aspergillus oryzae在亞洲用於製造發酵食品已有數百年歷史，為一種可以安全使用的菌種，除此之外，米麴菌由於可以生長於成本低廉的培養基上，生長快速，能夠大量生產及分泌多種胞外原態或重組蛋白質，而且具有詳細的分子生物研究背景，是一種極具潛力的蛋白質表達系統。本研究擬建立米麴菌蛋白質表達系統，為擴大產物應用價值，首先進行菌種鑑定，以分子鑑定輔以生化鑑定證實所用菌株為不生成黃麴毒素的A. oryzae。在建構表達質體方面，結合多項轉殖策略：同源啟動子與轉殖標記，高效率轉錄控制區域以及基因融合策略。將由瘤胃絕對厭氣性真菌Piromyces sp. T2分離出的

木聚醣酶基因，以米麴菌同源的gpd啟動子啟動木聚醣酶基因表現，並在N端加上glaA1-511胺基酸作為攜帶者蛋白質，同時在C端接上同源的gla終結子，最後將此同源表達套組插入pPTRI DNA 轉殖載體中。基因轉殖方面，利用β-glucurondiase預處理溶解部分細胞壁的發芽孢子為材料，25μF，100Ω，2500V電穿孔條件，將基因送入菌體中，根據轉殖載體上的pyrithiamine抗性基因作為選殖依據，篩選轉形株。最終抽取轉形株基因組DNA，以PCR放大插入的木聚醣酶基因的方式，證實成功得到轉形株，加上穩定度測試，顯示木聚醣酶基因插入菌體染色體當中穩定存在。儘管如此，所得到的轉形株，不

論是胞內或胞外皆無法測得木聚醣酶活性，推測可能的原因為，由於絕對厭氣性真菌基因序列具有AT-rich區域的特性，在真核表達系統表達時，可能導致轉錄作用不正常終止，無法得到全長的mRNA，進而影響蛋白質表達。

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