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高雄醫學大學 臨床醫學研究所 洪啟智所指導 余珮華的 血清鐵的缺乏與慢性腎臟病第一期至第四期之男性病患的腎臟結果具有相關性 （2021），提出KC2500關鍵因素是什麼，來自於血清鐵、慢性腎臟病、性別差異、腎臟結果。

而第二篇論文輔仁大學 生命科學系碩士班 李嘉雯所指導 陳建云的 JA誘導水稻PR基因啟動子之功能性分析 （2021），提出因為有 植物逆境、水稻、啟動子、逆境激素、甲基茉莉酸、分泌性訊息胜肽的重點而找出了 KC2500的解答。

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血清鐵的缺乏與慢性腎臟病第一期至第四期之男性病患的腎臟結果具有相關性

為了解決KC2500的問題，作者余珮華 這樣論述：

研究背景鐵是一種獨特的微量元素，其參與了人體多項生物反應。鐵質缺乏不僅會造成貧血，還會對高能量需求的臟器 (如：腦、心臟、骨骼肌等) 造成不良的影響。然而，目前鮮少有文獻去探討鐵質對腎臟功能的影響，尤其是針對慢性腎臟病之族群。此外，鐵儲存量也具有性別上的差異，即女性鐵的存量低於男性。然而，在慢性腎臟病患者中，其鐵的含量與腎臟結果之間的關係是否也存在著性別差異，目前尚未得到充份的研究。因此，本研究之目的在於探討在慢性腎臟病第一期至第四期的患者中，其鐵質含量與腎臟結果之間的關聯性。研究方法一共有2500名慢性腎臟病第一期至第四期的患者被納入此項前瞻性、觀察型的世代研究中；並依「性別」和「血清鐵數

值」(男性血清鐵< 70或≥ 70 μg/dL，女性血清鐵< 60或≥ 60 μg/dL) 分成四組。追蹤時間為3000天(約8.2年)。並各自依照男性組和女性組，去評估在男女兩組不同的性別組中，其血清鐵與多種結果的相關性。這些結果包含：(一)未來需接受腎臟替代療法者；(二)未來需接受腎臟替代療法合併腎絲球濾過率下降50%以上之複合式結果；(三)未來需接受腎臟替代療法合併在接受腎臟替代療法前即死亡之複合式結果。結果在8.2年的追蹤時間裡，547位(21.9%)患者接受「腎臟替代療法」、781位(31.2%)患者遇到「腎臟替代療法或腎功能下降50%以上之複合式結果」。而在充份調整的Cox迴歸模型

中：男性組方面，鐵質含量低的男性病患，相較於鐵質含量正常的男性病患，其將來遇到「腎臟替代療法」及「腎臟替代療法併腎功能下降50%以上之複合結果」的風險會顯著增加，風險比各別為1.46 (95 %信賴區間1.14至1.86)及1.28 (95 %信賴區間1.04至1.58)。而在女性組方面，鐵質含量低的女性病患，相較於鐵質含量正常的女性病患，其腎臟不良結果的風險反而未呈現顯著性上升。結論在男性慢性腎臟病第一期至第四期的患者中，其血清鐵含量與腎臟不良結果呈負相關；相較之下，在女性慢性腎臟病第一期至第四期的患者中，其血清鐵含量與腎臟結果之間並不具有顯著的相關性。此種血清鐵與腎臟結果於慢性腎臟病族群中

的關聯性，未來需要更進一步的介入性研究，來加以證明。

JA誘導水稻PR基因啟動子之功能性分析

為了解決KC2500的問題，作者陳建云 這樣論述：

植物為了克服多種環境逆境，會引發各種的訊息調控，以增加抗性或適應性。先前的研究於水稻懸浮培養液中鑑定出分子量為34 kDa之蛋白質 (PR-8)，且屬第三型幾丁質酶，並以各種逆境反應相關激素處理後發現，PR-8基因能受到甲基茉莉酸（MeJA）的誘導而表現。本研究進一步驗證PR-8基因在水稻幼苗全株皆會受MeJA之調控而有增加表現量。為了確認PR-8啟動子與JA訊息傳遞之調控活性區段，先以基因資料庫分析PR-8啟動子序列，發現有數個MYB、MYC、ERF和WRRY等逆境調控相關轉錄因子之結合域，依其分布初步將PR-8啟動子序列以5’端序列遞減方式設計四片段PR-8p.D0、D1、D2及D3構築

於啟動子表現載體，以用於菸草暫時性表現系統中分析啟動子活性，GUS活性分析後，經MeJA處理後PR-8p.D2和PR-8p.D3之啟動子活性均顯著提升，為進一步確認PR-8啟動子受JA訊息影響之關鍵活化位，接續設計以3’端序列遞減方式將啟動子序列3’端TATA box和5’UTR去除後加上35S minimal promoter，分別建構PR-8p.D1W、3’D1、D2W及D3W啟動子表現載體，GUS活性分析顯示，此四組3’端序列遞減的合成啟動子之基礎活性皆比PR-8全長啟動子者提高2~3倍，然而經MeJA處理後，活性則無明顯變化。此外，為回歸探討此水稻基因啟動子在水稻系統的基因調控特性，以

比較其與菸草模式中是否相同，本研究亦使用水稻懸浮細胞作為啟動子暫時性表現分析平台，5’端序列遞減之啟動子活性分析結果顯示，PR-8p.D0和PR-8p.D1受MeJA誘導，與其在菸草模式中的表現趨勢不同；而3’端序列遞減之啟動子分析結果顯示，PR-8p.D1W、D2W及D3W經MeJA處理後，均有GUS藍色產物，以上結果推測其啟動子D2至TATA box前的386 bp片段內含有JA訊息調控域。由於PR-8是一外泌性蛋白質，為了進一步探討其分泌訊息胜肽（Osss）在水稻細胞分泌性蛋白質表現系統之應用性，於菸草模式中觀察PR-8啟動子驅動表現Osss::GFP-GUS融合蛋白質，結果顯示GUS染

色藍色產物大量呈現在維管束，故推測GFP-GUS融合蛋白外泌至質外體後，累積於維管束周邊。綜合上述結果，PR-8啟動子D2-TATA間有1個MYB、2個ERF、2個MYC及2個WRKY反應之cis-elements，這些轉錄因子結合域可能與JA訊息傳遞有相關，且其基因中的5’UTR可能也影響啟動子的活性。未來可利用Osss分泌性及其啟動子誘導的特性，建立一具有應用性的水稻懸浮細胞分泌性外源蛋白質的表現系統。

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