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人類泌尿上皮癌中ZNF671作為一種新穎的過度甲基化腫瘤抑制基因及其應用於尿液中作為非侵入性的癌症檢測

為了解決Cobra cb的問題，作者葉佳銘 這樣論述：

泌尿上皮癌是泌尿系統中第二常見的癌症，也是世界第九常見的癌症。 泌尿上皮癌在台灣也是常見的癌症之一，其中又以西南沿海地區的發生率較高。雖然泌尿上皮癌的致死率不高，但復發率卻很高，患者術後都要定期的接受侵入性膀胱內視鏡的檢查及尿液細胞學追蹤，然而非侵入性的尿液細胞學的靈敏度卻很低，對於分化較好的癌症病患更是難以判別，因此若有高專一性、高敏感度的生物標記做為癌症檢測，將會顯著改善泌尿上皮癌病患的診斷。泌尿上皮癌復發致死現象的潛在分子機制目前仍然不是很清楚。近十幾年來，異常的基因啟動子甲基化現象被認為與癌症的發展有密切相關且藉由此現象來當作一個癌症診斷的指標。因此，可應用檢測體液細胞的基因啟動子甲

基化現象作為非侵入性和高靈敏性的癌症診斷工具。因此，本研究希望能從泌尿上皮癌中找出，被異常基因啟動子甲基化所黙化之新穎腫瘤抑制基因，並利用此基因作為非侵入性的癌症診斷生物標記。透過甲基化晶片(illumina 27K CpG island methylation array)分析，我們發現一個鋅指蛋白基因(ZNF671)的啟動子在泌尿上皮癌的組織樣本中有高度甲基化現象，此現象也進一步利用泌尿上皮癌細胞株和病人臨床檢體研究分析而得到證實。經體外啟動子甲基化分析和去甲基化藥物的處理，發現ZNF671的表達在泌尿上皮癌細胞株中是透過表基因遺傳學的方式被抑制。而在泌尿上皮癌細胞株中，若重新表達ZNF6

71可以抑制細胞群落的生成與細胞侵襲的現象；重新表達ZNF671的上皮癌細胞株接踵於在裸鼠皮下也有抑制細胞生長的現象，而這些現象有可能是透過降低幹細胞標記(cancer stem cell markers)的表現所引起。此外透過重亞硫酸鹽焦磷酸定序 (bisulphite pyrosequencing)分析泌尿上皮癌病患的腫瘤組織（n=96），發現較高ZNF671的甲基化有較差的分化及較短的復發存活率。為了探討ZNF671甲基化在尿液中作為生物標記並應用於非侵入性癌症診斷的可行性，我們收集膀胱癌病患的尿液檢體分為訓練組(n=97)與試驗組(n=61) ，藉由即時定量甲基化特異性連鎖聚合酶反應(

real time quantitative methylation-specific PCR, qMSP)來分析ZNF671甲基化檢測膀胱癌的靈敏度及特異度，顯示各為42%-48%和 89%-92.8%。結合ZNF671及另二個生物標記(IRF8 和sFRP1)在癌症尿液的檢測靈敏度上可以提升至96.2%，表示利用這三個基因標記可用來檢測泌尿上皮癌。總結以上結果，發現ZNF671在泌尿上皮癌中是一個新的腫瘤抑制基因並透過表基因遺傳學的方式被抑制，而利用此基因可以在尿液中作為生物標記並應用於非侵入性的癌症診斷，有助於提供臨床上的應用。