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國立中興大學 生命科學系所 陳全木所指導 莊家輝的 利用卵巢摘除大鼠為骨質疏鬆症動物模式評估克弗爾延緩骨質流失之功效 （2012），提出Canon MG2470關鍵因素是什麼，來自於摘除卵巢大鼠模式、骨質疏鬆、克弗爾發酵產物、Micro-CT、鈣離子吸收、Caco-2細胞株、奈米壓痕測試。

而第二篇論文長庚大學 生物醫學研究所 林光輝所指導 廖家蓉的 Grp58調控細胞侵襲能力並可作為子宮頸癌預後因子 （2010），提出因為有 葡萄糖調節蛋白58、子宮頸癌、預後、腫瘤侵犯的重點而找出了 Canon MG2470的解答。

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利用卵巢摘除大鼠為骨質疏鬆症動物模式評估克弗爾延緩骨質流失之功效

為了解決Canon MG2470的問題，作者莊家輝 這樣論述：

骨質疏鬆是一種生理疾病，特徵為低骨量以及骨組織結構退化，導致骨骼脆化，增加骨折的風險。骨質疏鬆症的發病率隨著年齡的增加，尤其好發於絕經後婦女，因為雌激素的缺乏，使停經後婦女蝕骨作用大於成骨作用。在所有預防和治療骨質疏鬆症的方案中，增加鈣的攝取量是最常被推薦的預防措施。克弗爾發酵產物是由酵母菌與乳酸菌共同發酵的乳製品，被認為具有免疫調節、降血壓、促進鈣質吸收、抗微生物等益生功能，在前人研究也指出發酵乳製品對於去卵巢動物模式及老化動物模式具有骨保護的作用，然而克弗爾相關研究付諸闕如，故本研究的目的在評估實驗室自行開發的克弗爾發酵產物對於骨保護功能的效益。實驗分為細胞與動物實驗兩部分，首先我們利用

人類大腸癌細胞株Caco-2細胞建立一個模擬腸道鈣離子吸收的細胞模式，經由鈣離子探針Fluo-3與細胞內鈣離子結合產生的螢光值變化可以評估克弗爾發酵產物添加之後對腸道細胞鈣離子吸收的影響。另外利用動物實驗評估克弗爾對於去卵巢大鼠模式延緩骨質流失之功效，將56隻16週齡SD(Sprague-Dawley)大鼠分為7個處理組：假手術組、控制組、克弗爾發酵產物組依人體建議劑量換算後之1倍、2倍及4倍、福善美組(alendronate)、市售產品組 (Rebone)以手術摘除卵巢後，經兩週恢復期以管餵方式進行試驗12週，犧牲後採血液進行骨生化指標分析鹼性磷酸酶(ALP)與C端第一型膠原蛋白胜肽(CTX

)。大鼠股骨以甲醛固定後，股骨骨佔組織比例 (BV/TV)、骨小樑厚薄度 (Tb.Th) 、骨小樑數量 (Tb.N)、骨小樑分離度 (Tb.Sp)及緻密骨骨礦物密度 (BMD)與3D重組圖形以高解析度X光電腦斷層掃描儀(Micro-CT)進行分析、配合組織染色切片(H&E stain)觀察骨小樑微結構變化，同時股骨幹以奈米壓痕測試儀(Nanoindention)進行生物力學分析。細胞實驗結果顯示克弗爾發酵產物能夠促進caco-2腸道細胞的鈣離子吸收。此外動物試驗顯示克弗爾發酵產物組可降低去卵巢大鼠骨吸收指標CTX，具有較高的骨礦物質密度並且有效延緩去卵巢導致的股骨部位骨佔組織比例、骨小樑厚薄度

、骨小樑數量流失同時降低骨小樑分離率，組織染色切片與Micro-CT重組圖形顯示克弗爾發酵產物處理組有較多的骨小樑分布，生物力學測試測試反應了骨小樑結構的變化，克弗爾發酵產物維持去卵巢大鼠的彈性模數與表面硬度，因此有較高的抗破壞係數。研究結果顯示，克弗爾發酵產物具有開發為預防骨質疏鬆保健產品之潛力。

Grp58調控細胞侵襲能力並可作為子宮頸癌預後因子

為了解決Canon MG2470的問題，作者廖家蓉 這樣論述：

子宮頸癌至今仍是危害全球婦女健康的第二大癌症。人類乳突瘤病毒感染是子宮頸癌最重要的危險因子，但單獨感染此病毒並不足以造成子宮頸癌變。因此尋找參與癌變過程的重要細胞分子標誌，將有助釐清子宮頸癌發生的機制。本研究共收集來自一百一十例分期涵蓋IA到IIB子宮頸癌病患之病歷及檢體進行研究分析。我們以蛋白體學技術，二維電泳及質譜分析，比較其中四例子宮頸癌病人癌區及鄰近非癌區組織蛋白表現的差異；再利用西方點墨法及組織免疫染色驗證；接著進行存活分析；最後再利用子宮頸癌細胞（HeLa cell）及動物模式（xenograft mouse model）來進行分子機制及分子功能的研究。我們發現Glucose

regulated protein 58（Grp58）在73.7%的癌組織有高於非癌組織1.3倍以上的表現。同時發現在子宮頸腺癌中Grp58蛋白表現顯著高於鱗狀上皮細胞癌中之表現、並且與腺癌子宮頸基質侵犯深度相關（P = 0.043）。腺癌組織中Grp58高度表現的病人其五年整體存活率（Overall survival）及未復發存活率（Recurrence-free survival）較Grp58低表現病人顯著降低（P值分別為0.004及0.019）。以多變量存活分析發現Grp58高度表現（P = 0.049）及具有淋巴轉移（P = 0.012）皆為影響未復發存活率的獨立因子；並且發現同時含有

這兩個危險因子的病人預後較其他病人更差（P = 0.001）。進一步進行Grp58分子功能研究，我們發現在子宮頸癌細胞中削弱Grp58表現會造成細胞侵襲能力降低。以寡聚核苷酸晶片試驗發現，抑制Grp58表現時造成參與Wnt訊息傳遞路徑的許多基因表現發生變化，同時觀察到β-catenin蛋白在細胞中穩定累積。造成　β-catenin蛋白累積的原因可能是ERK1/2及AKT持續活化，導致GSK3活性受到抑制而造成。而β-catenin可能是透過影響下游CD44增加及S100A4降低、或者促進β-catenin細胞黏附功能而抑制了Grp58表現削弱細胞之侵襲能力。綜合以上，我們發現Grp58為子宮頸

腺癌之預後因子。臨床上將淋巴轉移與否之指標輔以Grp58指標可望對子宮頸腺癌病人提供更正確的預後，並可做為決定治療方針與術後追蹤計畫之依據。

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