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探討小泛素化以及泛素化修飾對於腸病毒71 型3C 蛋白酶影響

為了解決2990WX price的問題，作者陳淑娟 這樣論述：

腸病毒71 型，是屬於小RNA 病毒科的一員，在臨床上已經被證實會導致嚴重的 中樞神經系統症狀。腸病毒3C 蛋白酶，對於腸病毒的複製是必須的，而且會藉由切割病毒前驅蛋白以及細胞內蛋白，來引起宿主細胞走向細胞凋亡。3C 蛋白酶在病毒形成的過程中，及對於細胞內蛋白的角色已被確定。然而對於宿主細胞蛋白是如何來調控3C 蛋白酶，卻知道的很少。在此我們證明了，小泛素化的修飾作用，可以促進腸病毒71 型3C 蛋白的泛素化修飾作用，進而走向降解，而此作用也和病毒的複製能力及細胞凋亡降低有關。在這篇研究中，小泛素化E2 結合酵素UBC9 被發現是腸病毒71 型3C 蛋白酶的結合蛋白。更進一步的研究指出腸病毒

71 型3C 蛋白酶，在它的第52 號Lysine 可以被小泛素化修飾。活體小泛素化的修飾，會抑制3C 蛋白酶活體外蛋白酶的活性及細胞內3C 蛋白質的穩定性，而這些都3C 蛋白酶突變種K52R(離胺酸突變成精胺酸)促進更多受質的切割和誘發更多細胞凋亡有關。更重要的是，重組腸病毒71 型3C-K52R 病毒株感染後，會導致更多的細胞凋亡現象和病毒在培養細胞中的數量。而這些現象都和在老鼠模式中腸道有更多的外殼蛋白VP1 和更多的神經元損失有關。最後我們證明了腸病毒71 型3C 蛋白酶的第45 號到第52 號胺基酸對於UBC9 蛋白結合的程度，決定了3C 蛋白酶被小泛素化修飾的程度，以及它的蛋白質穩

定性。除此之外，小泛素化修飾也會進一步改變3C 蛋白酶在細胞內的位置。我們也證明3C 蛋白酶蛋白質的衰退是經由內質網相關的蛋白質降解路徑 ( ER-associated degradation)所調控，而HRD1 是3C 蛋白酶泛素的E3 結合酶。而且進一步證明，USP14 則是負責3C 蛋白酶去泛素化(deubiquitin)的酵素。更重要的是，USP14 抑制劑IU1 可以顯著的降低3C 蛋白酶的蛋白半衰期，並進而抑制腸病毒的複製。總結以上的結論，我們的研究揭開了一個從前從未被發現的對抗腸病毒的細胞調節現象，這個現象解釋了藉由小泛素化及泛素化對於腸病毒71 型3C蛋白酶的修飾，可以進一步來

控制腸病毒71 型病毒的複製，以及宿主細胞的凋亡。